Дженніфер Еністон народилася 11 лютого 1969 року в родині актора Джона Енністона й моделі Ненси Еністон. Її дід (на прізвище Анастасакіс) приїхав у США із Греції й став власником закусочної.

Коли Дженніфер Еністон здійснилося 9 років, батьки розвелися. Дівчинка залишилася в Нью-Йорку з матір'ю, але часто їздила до батька в Лос-Анджелес.

Дженніфер Еністон не дуже охоче говорить про роки, проведених з матір'ю. Проте, судячи з її уривчастих реплік, можна припустити, що Ненси Еністон була не дуже щаслива в особистому житті й часто виливала на дочку свої фрустрації. Набагато охоче вона згадує, що в ті роки обожнювала групу Duran Duran і дуже любила малювати. Коли Дженніфер Еністон було 11 років, одна з її акварями потрапила на виставку в музей Metropohten.

Захоплення лицедійством почалося зі шкільного гуртка-драми-кружка, коли їй було дев'ять років. А в чотирнадцять Дженніфер Еністон пройшла важку співбесіду плюс прослуховування в Нью-Йоркській школі виконавської майстерності й була туди прийнята.

Дженніфер Еністон, закінчивши школу, виявилася на роздоріжжі. Вона почала одночасно шукати ролі у внебродвейских постановках і ходити на курси по психології. Протрималася на курсах усього п'ять місяців, можливо, зрештою стала б психотерапевтом, але тут підвернулася роль у п'єсі, і доля Дженніфер Еністон була вирішена. Вийшовши на дійсну професійну сцену, вона зрозуміла, що на курси не повернеться. Але п'єса незабаром зійшла зі сцени, і Дженніфер Еністон довелося зайнятися тим, чим дуже часто займаються безробітні акторки вона стала офіціанткою в забігайлівці на Upper West Side з підходящою назвою "Jackson Hole" ("Дира Джексона").

Цікавих ролей у театрі більше не підверталося, і по закінченні двох років Дженніфер Еністон вирішила виїхати в Лос-Анджелес. Зрештою вона знайшла агента, що погодився неї представляти, однак він поставив Еністон жорстку умову - вона повинна скинути 30 фунтів. Спочатку Дженніфер збунтувалася, але, посидівши без роботи ще кілька місяців, була змушена пройти багатоступінчасту систему похудания Nutn, щоб здобути фігуру, необхідну для скорення шоу-бізнесу. Після цього її чекали ролі в декількох маловдачних серіалах, і нарешті, в 1993 році Дженифер Анистон уперше знялася в кіно в жахливчику класу "Б" - "Лепрекон". На пам'ять про перший кінодосвід в неї залишився шрам на долоні.

Перша більша кінороль Дженніфер Еністон у фільмі "Вона така" (She's the One) показала, що вона не боїться бути на екрані не бажаною й некрасивою. Дженніфер зіграла незграбну й нелюбиму дружину ділка з Уолл-стріт який єхидно порівнює її із своєю коханкою (Камерон Діаз) і говорить, що якщо перша схожа на "б'юіка" 1974 року, те друга на новенький "порше". Саме смішне, що після виходу цього фільму режисера Еда Бернса закидали докорами, як він посмітив вивести національну улюбленицю Рейчел у такому непривабливому виді! Бідоласі довелося довго пояснювати, що він не винуватий, Дженніфер Еністон сама вибрала цю роль! До речі, коли вона прийшла на проби в серіал "Друзі" відбулося щось подібне їй запропонували роль умненької Моніки, але вона зволіла грати навіжену глупишку Рейчел, що на початку своїх телевізійніх подвигів з того, що кинула нареченого перед вівтарем.

Роль Рейчел підвернулася Дженніфер Еністон зовсім зненацька. Переїхавши в Лос-Анджелес, Дженніфер оселилася в богемній комуні акторів і режисерів, які, як і вона, приїхали в Голлівуд у надії пробитися в зірки. Один раз вона розповіла своєму агентові про це, і той, засміявшись, сказав, що на телеканалі NBC затівають шоу, у якому - по сюжеті повинне відбуватися приблизно те ж, із чим вона щодня зіштовхується у своїй комуні. Дженніфер Еністон була заінтригована й попросила влаштувати їй пробу.

Дженніфер Еністон не схожа на свою героїню у "Друзях" - Рейчел, акторці не відмовиш у розумі й напористості. Гонорари за "Друзів" вона використала для створення власної кінофірми. Перший проект, що зараз розкручує Дженніфер Еністон, трагікомедія "Щось огидне", де вона збирається зіграти кепське дівчисько з непомірним марнославством, що у фіналі її приятелька штовхає під колеса автобуса.

Дженніфер Еністон в 1995 році коли серіал тільки тільки почав завойовувати славу, перша із усього акторського складу "Друзів" стала зніматися у великому кіно. Одночасно Еністон зійшла на зовсім нову, не звідану для більшості акторів територію. Вона знялася... у комп'ютерній грі. Але не в стандартної стріляльці-бродилці, а особливій грі для кіноаматорів, що думають себе режисерами й примеривающихся до майбутньої слави. Гра називалася "Режисерське крісло Стівена Спілберга", а партнером Дженніфер Еністон був Квентін Тарантіно.